La colorazione, durante un'analisi citoistochimica, è l'insieme di tecniche che servono a far risaltare, per mezzo di opportuni coloranti, le strutture cellulari del campione. Attraverso la colorazione è possibile distinguere, all'interno della cellula, le varie strutture apprezzandone la morfologia, la quantità e la disposizione. L'utilizzo delle tecniche di colorazione può servire sia a fini conoscitivi, ad esempio per comprendere la disposizione delle strutture cellulari, sia per fini diagnostici. In quest'ultimo caso, ad esempio, è possibile servirsi dei coloranti per rilevare strutture anomale o patologiche.
Le tecniche di colorazione possono variare in base al tipo di analisi e al campione da trattare. In linea generale, il campione deve essere idratato poiché la maggior parte dei coloranti si scioglie in acqua e, per questa ragione, la cellula o il tessuto deve possedere una sufficiente quantità di acqua all'interno affinché il colorante possa aderire alle strutture.
I coloranti possono essere naturali, ad esempio estratti da piante, o artificiali. Ciascun colorante è specifico per poche strutture e l'affinità è basata sulle proprietà chimiche.
Classificazione dei coloranti
I coloranti possono essere classificati in base alla loro struttura chimica; si definiscono coloranti acidi l'insime di molecole che reagiscono con strutture basiche, e coloranti basici le molecole maggiormente affini per le sostanze acide.
Lista dei principali coloranti utilizzati in microscopia ottica
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Nome
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Tipo
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Affinità
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Ematossilina
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Basico
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Colora il nucleo ed il RER di blu-viola
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Eosina
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Acido
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Colora il citoplasma in rosa, rosa chiaro e gli eritrociti in rosso.
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Blu di toluidina
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Anfotero
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Colora il nucleo di blu-viola.
Colora gli acidi nucleici di blu-viola.
Colora il citoplasma di blu-viola.
Colora alcuni polisaccaridi di rosso.
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Fucsina acida
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Acido
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Colora gli eritrociti in arancione. Usata nella colorazione del tessuto connettivo.
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Violetto metile
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Acido
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Colora l'amiloide in viola.
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Verde luce
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Basico
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Colora le fibre collagene in verde.
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Blu alcian
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Basico
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Colora alcune mucosostanze (glicosaminoglicani) in blu.
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Rosso congo
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Anfotero
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Colora i nuclei in blu.
Colora l'amiloide in rosso.
Colora il connettivo in rosso.
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Blu di metilene
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Basico
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Colorante usato nella colorazione di Gram ed in altre colorazioni. Ha una blanda attività e viene preferito nelle cosiddette colorazioni “in vivo”.
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